近日市場監(jiān)管總局批準(zhǔn)發(fā)布了《保健食品中西地那非和他達(dá)拉非的快速檢測-膠體金免疫層析法》（KJ201901），本方法規(guī)定了保健食品中西地那非和他達(dá)拉非的膠體金免疫層析快速篩查方法。
1 范圍
本方法適用于聲稱具有抗疲勞、調(diào)節(jié)免疫等功能的保健食品中西地那非和他達(dá)拉非成分的快速篩查。
2 原理
本方法采用競爭抑制免疫層析原理。樣品中的西地那非和他達(dá)拉非等物質(zhì)經(jīng)提取后與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合，抑制抗體和試紙條或檢測卡中檢測線（T線）上抗原的結(jié)合，從而導(dǎo)致檢測線顏色深淺的變化。通過檢測線與控制線（C線）顏色深淺比較，對樣品中西地那非和他達(dá)拉非成分進(jìn)行定性判定。
3 試劑材料
3.1 試劑
除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的二級水。
3.1.1 甲醇：色譜純。
3.1.2 三羥甲基氨基甲烷，Tris堿。
3.1.3 濃鹽酸。
3.1.4 吐溫-20。
3.1.5 鹽酸溶液：量取濃鹽酸（3.1.3）16.7 mL，用水溶解并稀釋至100 mL。
3.1.6 緩沖液：稱取12.1 g Tris堿（3.1.2），加適量水溶解，混勻，用鹽酸溶液（3.1.5）調(diào)節(jié)pH至8.0，加入5.0 g吐溫-20（3.1.4）攪拌均勻，定容至1000 mL。
3.2 參考物質(zhì)
參考物質(zhì)的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子量見表1，純度均≥99%。
注：或等同可溯源物質(zhì)。
3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
3.3.1 西地那非標(biāo)準(zhǔn)儲備液（1.0 mg/mL）：精密稱取適量西地那非參考物質(zhì)（3.2），用甲醇（3.1.1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度為1.0 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。-20℃避光保存，有效期1年。
3.3.2 西地那非標(biāo)準(zhǔn)工作液（10 μg/mL）：精密移取適量西地那非標(biāo)準(zhǔn)儲備液（1.0 mg/mL）（3.3.1）分別置于10 mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1）稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度為10 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液。-20℃避光保存，有效期3個月。
3.3.3 他達(dá)拉非標(biāo)準(zhǔn)儲備液（0.5 mg/mL）：精密稱取適量他達(dá)拉非參考物質(zhì)（3.2），用甲醇（3.1.1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度為0.5 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。-20℃避光保存，有效期1年。
3.3.4 他達(dá)拉非標(biāo)準(zhǔn)工作液（10 μg/mL）：精密移取適量他達(dá)拉非標(biāo)準(zhǔn)儲備液（0.5mg/mL）（3.3.3）分別置于10 mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1）稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為10 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液。-20℃避光保存，有效期3個月。
3.4 材料
4 設(shè)備與儀器
4.1 設(shè)備
4.1.1 天平：感量為0.1 mg和0.01 g。
4.1.2 渦旋混合器。
4.1.3 移液器：20-200 μL，100-1000 μL，5 mL。
4.1.4 離心機(jī)：轉(zhuǎn)速可達(dá)4000 r/min以上。
4.2 儀器
4.2.1 讀數(shù)儀：產(chǎn)品配套可使用的檢測儀器（可選）。
4.2.2 環(huán)境條件：溫度10-40℃，相對濕度≤80%。
5 分析步驟
5.1 試樣制備
液體樣品充分混勻，固體樣品充分粉碎混勻。
5.2 試樣提取和凈化
5.2.1 液體基質(zhì)
量取0.5 mL±0.02 mL試樣于15 mL離心管中，加入4 mL緩沖液（3.1.6），渦旋混合30 s，作為待測液。
5.2.2 固體基質(zhì)
5.2.2.1 檢測西地那非
準(zhǔn)確稱取試樣0.5 g±0.01 g于15 mL離心管中，加1 mL甲醇（3.1.1），渦旋30 s，4000 rpm離心2 min或靜置2 min。取250 μL上清液于2 mL離心管中，加入750 μL緩沖液（3.1.6），渦旋混合30s，作為待測液。
5.2.2.2 檢測他達(dá)拉非
